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Auf welche Weise lassen sich die Längen der Fragmente bestimmen?
Als Referenz lässt man einen Marker aus DNA-Molekülen mitlaufen, deren Länge man kennt. DNA/RNA Fragmente sind nativ nicht sichtbar und werden deshalb mit Ethidiumbromid oder Megafluor angefärbt. Die Färbung erzeugt die typischen sichtbaren „Banden“ im Trägermedium.
Warum wandern lange DNA-Fragmente langsamer als kürzere?
Bei längeren Fragmenten liegt eine stärkere Reibung als bei kürzeren Fragmenten vor, sie werden dadurch proportional stärker zurückgehalten und wandern daher langsamer.
Was versteht man unter Elektrophorese?
Unter Elektrophorese versteht man die Wanderung geladener Teilchen in einem elektrischen Feld. In der Analytischen Chemie ist Elektrophorese ein Oberbegriff für verschiedene Trenntechniken, welche ionische Substanzen in einem elektrischen Feld gemäss ihrer Ladung und Grösse trennen.
Welche Nachteile gibt es bei der Gel-Elektrophorese?
Bei der Elektrophorese ist die stationäre Phase ja nicht an der Trennung beteiligt und chemisch relativ inert. Zu den Nachteilen zählt die Beschränkung auf geladene Analyten sowie die eingeschränkte Reproduzierbarkeit der Wanderstrecken in der Gel-Elektrophorese sowie der Migrationszeiten in der CE.
Was ist ein Probenpuffer?
Ein Probenpuffer erfüllt verschiedene Funktionen. Durch die enthaltenen Puffer wird der pH-Wert der Probe stabilisiert. Meistens wird das gleiche Puffersystem wie im Elektrophoresepuffer verwendet. Weiterhin enthalten Probenpuffer elektrisch neutrale, wasserlösliche Moleküle höherer Dichte wie z.
Welche Elektrophorese eignet sich zur Trennung von Molekülen?
Elektrophorese eignet sich zur Trennung geladener Moleküle. Die Moleküle müssen also Ionen sein oder zumindest beim pH-Wert der eingesetzten Pufferlösung durch Protonierung oder Deprotoniernung in einer ionischen Form (positiv oder ne- gativ geladen) vorliegen.