Wieso wandern DNA Fragmente bei der Agarose Gel Elektrophorese im elektrischen Feld zur Anode?
DNA lässt sich auf Agarose-Gelen elektrophoretisch auftrennen. Bei entsprechendem pH-Wert liegen die Phosphatgruppen der Nukleotide dissoziiert vor (negative Ladung). Dementsprechend wandern die Nukleinsäuren im elektrischen Feld zur Anode.
Was sind die wichtigsten Anwendungen der Elektrophorese?
Kontamination der Probe. Die wichtigsten Anwendungen der Elektrophorese ist als Werkzeug für die Analyse von DNA in der Molekularbiologie, aber auch in der Forensik als Mittel der Identifizierung von Proben von einem Tatort. Es ist wichtig, dass die Quellen von Fehlern in dieser Technik minimiert werden, um korrekte Ergebnisse.
Wie funktioniert die DNA-Färbung bei UV-Licht?
Die DNA-Färbung erfolgt mit Ethidiumbromid ( EtBr ), welches aufgrund seiner planaren Struktur zwischen den Basen der DNA interkaliert. Bei Bestrahlung mit UV-Licht fluoresziert Ethidiumbromid im sichbaren Bereich rosa bis lila, so daß die aufgetrennte DNA bei Auflage des gefärbten Gels unter eine UV-Lampe als rosa bis lila Banden sichtbar wird.
Wie kann man eine DNA-Menge in einem Gel sichtbar machen?
Durch Anfärben mit Ethidiumbromid kann eine DNA-Menge von 5 ng in einem Gel noch sichtbar gemacht werden. Während sich bei der Ethidiumbromid-Färbung im Gelbild weiße Banden auf schwarzem Grund zeigen, sind bei der Färbung mit dem blauen Farbstoff Azu-B-chlorid, der alternativ verwendet wird, im Gelbild schwarze Banden auf hellem Grund zu sehen.
Was ist eine elektrophoretische Mobilität?
Die elektrophoretische Mobilität von zwei zu trennenden Teilchen muss unterschiedlich sein, um eine Trennung mittels Elektrophorese zu erreichen. Die elektrophoretische Mobilität ist die Summe vieler physikalischer Faktoren, die letztendlich die Wanderungsgeschwindigkeit eines Teilchens während der Elektrophorese beeinflussen.