Was ist eine HPLC-Anlage?

Was ist eine HPLC-Anlage?

Jeder Eluent wird von einer Pumpe gefördert und die Mischung erfolgt auf der Druckseite der Anlage. Dazu wird eine Mischkammer verwendet. Eine solche Anlage wird als Hochdruckgradienten HPLC bezeichnet. Bei der Förderung des Eluenten durch die HPLC-Anlage baut sich Druck auf. Den Hauptanteil bewirkt hierbei die Säule.

Wie wird HPLC in der chemischen Industrie eingesetzt?

HPLC wird nicht ausschließlich zu analytischen Zwecken eingesetzt sondern auch in der chemischen Industrie, um ein Produkt (z. B. Proteine) von Verunreinigungen zu trennen. Hierbei kommen Säulen mit bis zu einem Meter Durchmesser zum Einsatz. Zur Zeit herrscht der Trend, immer höheren Probendurchsatz zu erreichen.

Wie kann ich eine HPLC-Säule verwenden?

Zur Verwendung einer HPLC-Säule kann ein Druck von 100 – 200 bar notwendig werden. UHPLC hat noch höhere Trennleistung In Entwicklung sind HPLC-Systeme, die Säulen mit noch kleineren Partikeln verwenden (1 µm) und daher noch höhere Drücke (2000 bar und mehr!) einsetzen müssen: Ultrahigh-Pressure Liquid Chromatography (UHPLC).

Ist die HPLC auch für die Reinigung von Substanzen geeignet?

Die HPLC findet auch Verwendung für die Reinigung von Substanzen als (semi-)präparative HPLC. Die Innendurchmesser können erheblich größer sein, da bis hin zum Produktionsmaßstab eine Aufreinigung durchgeführt werden kann.

Was ist Fest-Flüssig Chromatographie?

Unter dem Begriff Fest-Flüssig – Chromatographie werden physikalische Methoden zusammengefasst, bei denen eine Stofftrennung durch Verteilung zwischen einer stationären, festen Phase und einer sich bewegenden, mobilen, flüssigen Phase erfolgt (z. Bsp. HPLC).

Welche Trennmethoden benötigt man für eine HPLC-Analyse?

Die derzeit am häufigsten eingesetzte Trennmethode ist die Reversed Phase. Ionenaustausch-, Ionenpaarbildung-, Ausschluss- und Affinitätschromatographie finden mehr in speziellen Trennproblematiken ihre Anwendung. Welche Geräte / Bauteile benötigt man für eine HPLC-Analyse?

Welche Detektionstechniken werden in der HPLC eingesetzt?

In der HPLC werden die angeführten Detektionstechniken eingesetzt. Die Wahl des Detektors richtet sich meist nach den zu analysierenden Komponenten. So kann ein elektroanalytischer Detektor nur für elektrochemisch aktive Substanzen eingesetzt werden, und ein RI-Detektor wird meist bei Zuckeranalysen verwendet.

Welche Parameter sind wichtig bei HPLC-Säulen?

Weitere Kennwerte bei HPLC-Säulen Wichtige Parameter bei der Säulenauswahl sind Partikeldurchesser, Porengröße, Oberfläche und die funktionelle Gruppe und Dicke der Oberflächenbelegung der Trennsäule. Gleichmäßige und sehr kleine Partikel bilden die Grundlage der stationären Phase.

Wie kann ich die Pumpe komplett überholen lassen?

Möglichkeit 1: Den Kundendienst bestellen und die Pumpe komplett überholen lassen. Das ist die sicherste und teuerste Methode. Möglichkeit 2: Selbst herausfinden, warum die Pumpe nicht fördert und sie mit einfachen Mitteln wieder in Gang setzen.

Was ist die Chromatographie?

Bei der Chromatographie handelt es sich um ein Trennverfahren, bei dem ein Stoffgemisch mit Hilfe von zwei Phasen, einer stationären und einer mobilen Phase, aufgetrennt wird. Wenn von Flüssigchromatographie die Rede ist, dann ist die stationäre Phase ein Feststoff, die mobile Phase eine Flüssigkeit.

Wie groß ist die Partikelgröße bei der HPLC?

Im Vergleich zur normalen Flüssigkeitschromatographie im Niederdruckbereich ist die Teilchengröße der stationären Phase bei der HPLC mit < 10 μm erheblich kleiner. Je kleiner die Partikel sind, desto höher ist die Trennleistung.

Was ist die Trennleistung der Säulen-Chromatographie?

Die Trennleistung der normalen Säulen-Chromatographie war daher für viele Anwendungen nicht ausreichend. Der Ausweg:man setzt Druck ein, um die Flüssigkeit durch die Säule zu pumpen. Dann kann man viel kleinere Partikelals stationäre Phase einsetzen, hat dadurch eine hervorragende Trennungund kann relativ kurze Säuleneinsetzen.

Wie geht es mit der HPLC-Säule?

Über eine separate Kapillare, der sogenannten Probenschleife, führt der Injektor über ein Ventil die zu analysierende Probe zu, welche vom Laufmittelstrom mitgerissen wird. Das Laufmittel samt Probe fließt nun weiter und trifft auf die HPLC-Säule (D).

Was ist die Sensitivität des Detektors für Analyten?

Die Durchflusszellen sind nur mit sehr kleinen Durchmessern versehen, dafür aber mit langem Lichtweg. Die Sensitivität des Detektors für einen Analyten ist am größten, wenn die Wellenlänge gewählt wird, bei der im UV-Spektrum des Analyten ein Maximum vorliegt.