Inhaltsverzeichnis
Wie reinigt man Proteine?
Proteinreinigung bezeichnet den Vorgang, aus einer Lösung, die mehrere Proteine enthält, eines oder mehrere dieser Proteine zu vereinzeln. Meistens wird die Trennung auf biochemischem Wege und unter Verwendung chromatographischer Systeme ausgeführt.
Warum reinigt man Proteine?
Proteinreinigung dient dazu, ein bestimmtes Protein aus biologischem Material (Zellen, Gewebe) zu isolieren. Im Prozess der Reinigung müssen zunächst verschiedene andere Zellinhaltsstoffe wie Nucleinsäuren und Kohlenhydrate abgetrennt werden.
Wie isoliert man ein Protein?
Zur Isolierung der Proteine müssen die Zellen zunächst lysiert (aufgebrochen) werden. Am einfachsten geschieht dies durch eine osmotische Lyse, bei der die Zellen in eine hypotonische Lösung gebracht werden. Wasser dringt in die Zellen ein und führt nach einiger Zeit zum Zerplatzen dieser Zellen.
Warum fallen Proteine aus?
Bei hoher Ionenkonzentration stehen nicht mehr genügend Wasser-Moleküle zur Solvatisierung der Proteine zur Verfügung, die Wechselwirkungen zwischen den Proteinen werden stärker als die Interaktion mit dem Lösungsmittel, die Proteine aggregieren und fallen aus.
Was ist ein rekombinantes Protein?
Eiweiße, die mit Hilfe von gentechnisch veränderten (Mikro-)Organismen hergestellt werden. Bakterien, Pilze oder Säugetierzellen werden genutzt, um bestimmte Eiweiße in größeren Mengen zu produzieren.
Warum fallen Proteine bei hohen Salzkonzentrationen aus?
Erhöht sich die Salzkonzentration weiter, nimmt die Löslichkeit von Proteinen ab, es kommt zum Aussalzen eines Proteins aus der Lösung. Dieser Effekt beruht vor allem auf der Konkurrenz von Protein und Salz-Ionen um die solvatisierenden Wasser-Moleküle.
Was sind rekombinante Stoffe?
Rekombinante Proteine sind biotechnologisch hergestellte Proteine, die mit Hilfe von gentechnisch veränderten Organismen oder mit transient transfizierten Zellkulturen erzeugt wurden.
Welche Proteine werden durch transgene Bakterien hergestellt?
Gentechnisch werden hauptsächlich Proteine hergestellt Gentechnisch hergestellte Pharmaka sind durchweg Proteine, denn die Gentechnik nutzt das Prinzip der Proteinbiosynthese, in deren Verlauf die genetische Information der DNA in eine bestimmte Aminosäurensequenz übersetzt wird.
Was ist eine Proteinreinigung?
Im Zuge einer Proteinreinigung wird das gewünschte Protein von zellulären Proteinen und anderen Biomolekülen getrennt und nachfolgend charakterisiert. Oftmals werden zur Reinigung und zum Nachweis proteolysierbare Protein-Tags verwendet, die anschließend abgetrennt werden. Friedrich Lottspeich, Joachim W. Engels (Hrsg.):
Was sind rekombinante Proteine?
Rekombinante Proteine sind biotechnologisch hergestellte Proteine, die mit Hilfe von gentechnisch veränderten Organismen oder mit transient transfizierten Zellkulturen erzeugt wurden.
Welche Aminosäuren kommen bei Proteinen vor?
Im Gegensatz zu Kohlenhydraten und Nukleinsäuren kommen durch die verschiedenen enthaltenen Aminosäuren manche Strukturmotive nur bei Proteinen vor, z. B. Sulfhydryl -enthaltende Cysteine. Diese können für eine selektive Molekülmarkierung verwendet werden.
Wie funktioniert das Protein-Engineering?
Durch Protein-Engineering können Eigenschaften des rekombinanten Proteins angepasst werden. Das Vektordesign ermöglicht eine Anpassung des Vektors. Nach Klonierung eines Transgens (engl. insert) in einen Vektor erfolgt das Einschleusen der erzeugten rekombinanten DNA in einen Organismus.